真菌毒素是严重危害人类健康和食品质量安全的一类天然毒素。随着我国对真菌毒素污染管控的愈加严格，贝茵莱针对黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、呕吐毒素的检测分别研发3款ELISA试剂盒。可实现粮食、饲料中这3种真菌毒素的快速定量检测，一次性检测10个样本，仅需约30 min，助力科研更快速、更方便。

 

产品简介

 

Bio-Swamp

黄曲霉毒素B1

玉米赤霉烯酮

呕吐物素

黄曲霉毒素B1(AflatoxinB1,AFB1)是一类真菌（如黄曲霉和寄生曲霉）的有毒的代谢产物，具有很强的致癌性，1993年黄曲霉毒素被世界卫生组织的癌症研究机构定为I类致癌物。

玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)主要由禾谷镰刀菌产生的具有雌激素作用的有毒代谢产物，又称为F-2毒素。2017年被世界卫生组织国际癌症研究机构定为3类致癌物。

呕吐毒素(Deoxynivalenol, DON)属于单端孢霉烯族化合物，主要由禾谷镰刀菌、尖孢镰刀菌、串珠镰刀菌、拟枝孢镰刀菌、粉红镰刀菌、雪腐镰刀菌等镰刀菌产生。

 

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产品原理

 

Bio-Swamp

采用间接竞争ELISA法，标准品或样品中目标真菌毒素，与预包被在微孔中的抗原竞争结合溶液中目标真菌毒素抗体，经酶结合物反应，洗涤除去未反应试剂，再经底物显色；标准品或样品中呕吐毒素含量与其吸光度呈负相关。

 

检测步骤

 

Bio-Swamp

  

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检测前准备

(1)实验前，请将检测试剂盒从2-8°C冰箱中取出，于室内温度20-28°C下平衡1小时;

(2)检测开始前需准备好所需试剂；
(3)取出所需体积的试剂，其余放回盒内；
(4)未使用完的试剂请勿倒回原试剂瓶内，移取每一种试剂需更换吸头，以免交叉污染；
(5)请不要在通风口、阳光直射下检测，以避免造成微孔微环境差异导致检测失败。

 

 

洗液（1×）配制

取1体积的20×浓缩洗液，加入19体积的去离子水或蒸馏水混匀。

 

 

检测步骤

(1)加50 μL标准品/样本于相应微孔中；

(2)加50 μL酶结合物和50 μL抗体至所有微孔；
(3)盖上板贴，于20-28°C下，孵育15分钟，倒出微孔中液体；
(4)将洗涤液注满微孔浸泡15 s倒出，重复5次；
(5)加100μL底物至微孔中，于20-28°C下，孵育5分钟；
(6)加100 μL终止液至微孔中，于450/630nm波长下，读数；
注意：加标准品时，建议从低浓度到高浓度；加终止液后，请于30 min内读数；读数前用无尘布轻轻擦掉微孔底部的水珠或异物。

 

    

如您在实验中对实验反馈结果有疑问，可下滑查阅下列常见问题解答指南，必要时您可以联系正规渠道购买的业务经理获取技术邮箱反馈。您可以转发或收藏此文，作为实验教学参考。

常见问题解答

 

Bio-Swamp

 

01

不显色或显色浅

 

原因分析	解决办法
试剂变质：酶、抗体、底物、酶标板等失活；	更换新产品
未复温或复温时间不够;	参照说明书复温
室内环境温度过低 （低于18°C）	控制室内环境温度或借助恒温培养箱
其他原因：操作不当	使用前请仔细阅读说明书

 

02

显色过深

 

原因分析	解决办法
未及时终止	及时进行相应地实验操作
环境温度过高（超过30°C）	控制室内环境温度或借助恒温培养箱
洗板不彻底或未洗板	洗板严格参照 说明书执行

 

03

标准曲线相差较大或线性差

 

原因分析	解决办法
①标准品污染 ②试剂污染：酶、抗体、底物；	更换新产品
环境温度过高或过低	控制室内环境温度或借助恒温培养箱
洗板不彻底或未洗板	洗板严格参照说明书执行
其他原因：操作不当	使用前请仔细阅读说明书

 

04

标准曲线正常但样本全阴性

 

原因分析	解决办法
样本稀释液变质	①更换新产品 ②使用前请仔细阅读说明书

 

05

标准曲线正常但样本全阳性

 

原因分析	解决办法
①样本稀释液变质； ②取阳性样本未更换新吸头或移液管；	①更换新产品 ②使用前请仔细阅读说明书